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雙熒光素酶報告基因檢測【miRNA對靶基因調(diào)控研究】
miRNA通過堿基互補(bǔ)配對的方式識別靶基因的3’UTR區(qū)，并根據(jù)互補(bǔ)程度的不同指導(dǎo)沉默復(fù)合體降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。因此，可以將目的基因的3’UTR區(qū)域構(gòu)建到含luciferase的報告基因上，通過比較miRNA過表達(dá)或inhibitor 與報告基因作用檢測熒光值的變化，判斷miRNA對靶基因的作用。再通過對3’ UTR區(qū)進(jìn)行定點(diǎn)突變的方法進(jìn)一步確定miRNA與靶基因3’UTR的作用位點(diǎn)。miRNA對靶基因功能的調(diào)控是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。通過利用雙熒光素酶報告基因檢測實(shí)驗(yàn)尋找或驗(yàn)證miRNA對靶基因的調(diào)控作用是當(dāng)前最常用的技術(shù)。
作用示意圖
服務(wù)簡介
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