本制品是由miRNA反轉(zhuǎn)錄及miRNA定量?jī)刹糠衷噭┙M成。反轉(zhuǎn)錄部分的反轉(zhuǎn)錄酶M-MLV純化自含有莫洛尼氏鼠白血病病毒逆轉(zhuǎn)錄酶,,對(duì)該酶進(jìn)行修飾的新型反轉(zhuǎn)錄酶,,酶活性高,反轉(zhuǎn)錄效率更快,。具有較弱的RNAseH 活性和較高的熱穩(wěn)定性,,可在37℃-60℃之間以miRNA Adaptor Primer為引物合成miRNA的cDNA,。
定量部分中的2×SG Green miRNA qPCR Mix是采用SYBR? Green I嵌合熒光法進(jìn)行miRNA 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的專用預(yù)混試劑。制品中含有real-time qRT-PCR反應(yīng)的最適濃度SYBR? Green I及****的反應(yīng)緩沖體系包含PCR反應(yīng)的通用miRNA Rprimer,。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),,在反應(yīng)體系中加入模板和正向引物(即miRNA本身序列或有部分修飾堿基)即可,配制十分方便簡(jiǎn)單,。熒光染料SYBR? Green I僅與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出熒光,,通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)體系中的SYBR? Green I熒光強(qiáng)度,達(dá)到實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR產(chǎn)物擴(kuò)增量的目的,,可以對(duì)目的miRNA進(jìn)行準(zhǔn)確定量,。
1. 試劑盒由,,反轉(zhuǎn)錄及定量?jī)刹糠衷噭┙M成,優(yōu)化組合,,定量準(zhǔn)確,;
2. 操作簡(jiǎn)單快捷,miRNA反轉(zhuǎn)錄一步完成,。