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背景說明
熒光素酶（Luciferase）是生物體內(nèi)催化熒光素或脂肪醛氧化發(fā)光的一類酶的總稱,，來自于自然界能夠發(fā)光的生物,。目前，以北美螢火蟲（Photinus pyralis）來源的熒光素酶基因應(yīng)用的最為廣泛,。利用熒光素酶與底物結(jié)合發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的特性,，把感興趣的基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控元件克隆在螢火蟲熒光素酶基因的上/下游,，構(gòu)建成熒光素酶報告質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,，經(jīng)適當(dāng)刺激或處理后裂解細(xì)胞,，測定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性的高低判斷刺激前后或不同刺激對感興趣的調(diào)控元件的影響,。
服務(wù)流程:
實驗材料確認(rèn)—重組質(zhì)粒制備—材料選擇—轉(zhuǎn)化/染—裂解細(xì)胞—熒光檢測—數(shù)據(jù)分析
此檢測適用于：
1,、啟動子結(jié)構(gòu)分析：將啟動子區(qū)域序列（通常2k左右）進行分段截短，或?qū)μ囟ㄎ稽c進行突變,，再分別構(gòu)建入熒光素酶報告載體,，檢測其啟動子活性。
2,、啟動子SNP分析：一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性,，可運用螢光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。
3,、驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用：將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體,，同時在實驗細(xì)胞中共轉(zhuǎn)其轉(zhuǎn)錄因子，可分析轉(zhuǎn)錄因子是否提高螢光素酶活性,。
4,、驗證啟動子活性：將待測啟動子構(gòu)建至熒光素酶基因的上游，檢測啟動子的活性,。
客戶提供:
提供轉(zhuǎn)錄因子/啟動子的核酸序列或登錄號,。
交付內(nèi)容:
1、重組載體的全序列信息和注釋信息,；
2,、重組載體的酶切圖譜,；
3,、重組載體的測序結(jié)果；
4,、重組載體：一份質(zhì)粒,、一份大腸桿菌菌液（25%甘油菌）；
(上述4點是由我司構(gòu)建載體,。)
5.完整的實驗報告,含3組雙熒光酶活圖片,。
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